McA-RH7777大鼠肝癌细胞株

产品编号: C0840

中文缩写: McA-RH7777细胞

中文名称: McA-RH7777(大鼠肝癌细胞)

T25培养瓶发货形式是用T25细胞培养瓶直接发货的形式。收到细胞后,拆开包装T25培养瓶的自封袋,不拆封口膜,表面喷75%酒精消毒后显微镜观察细胞状态(有条件可以拍下此时细胞照片)。将细胞放入37度培养箱平衡两小时以上,再处理细胞。首先将T25中培养基取出装好备用,如细胞密度高于80%,可以直接消化传代,相反则加入5-6ml培养基放回培养箱继续培养即可。背景资料: 见细胞说明书

产品来源: 细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国内外著名大学建系

"公司提供贴壁、半贴壁、悬浮、半悬浮、贴壁与悬浮混合等细胞特性,一般细胞培养PBS量是10%,如果出现细胞状态不良情况,可以提高PBS量到15%,待细胞稳定后,调回PBS量10%McA-RH7777大鼠肝癌细胞株,对于初次实验者,一般细胞培养,都需要加入双抗防止细胞污染,细胞汇合度达到90%,我们开始寄送,这样可以保持细胞收到时,良好的细胞活力。复苏细胞注意事项:

1收到细胞后当天换液,全部更换成客户自己的新鲜培养基,放进培养箱,第二天再消化。

2边观察边消化,根据细胞的形态,终止消化时间,采取以半分钟间隔吹打细胞边缘,如可吹打下来,即终止消化。客户摸索的消化时间。

3随细胞有一份细胞操作说明书,请客户仔细查看。

4记得加1%双抗,降低被污染的概率。另外尽早冻存留种,以备后用。

5售后时间为一周,仅限于细胞本身的质量问题,而因乙方自己不当操作(不规范操作,消化过度,不加双抗导致的污染等)导致的细胞问题不在售后范畴。

6收到细胞后,如细胞状态不佳,或培养中遇到问题,烦请当天尽快联系,以便处理。当天及时反馈细胞情况和细胞照片是售后跟踪处理重要的参考依据,请您务必重视。

7刚收到细胞时,胎牛血清可以用15%培养两三天,利于细胞尽快恢复状态,细胞状态稳定后,再调回10%即可。

(其中1,2条针对于贴壁细胞,悬浮细胞详情请见细胞操作说明书)" P4

产品包装: 复苏T25培养瓶(一瓶)或冻存1ml冻存管(两支)

产品规格: 110(6)

离心管发货形式是用15ml离心管发货的形式,只用于悬浮细胞发货。收到细胞后消毒处理及将细胞放入37度培养箱平衡两小时以上,再处理细胞。首先将T25中培养基取出装好备用(如果实验室没有T25培养瓶,可以暂时T75 培养瓶,加入10-15ml培养基建议10ml培养基,也可以使用T175 培养瓶,加入50-60ml培养基,培养瓶越大,需要的培养基越多。当然如果刚接收到细胞密度不够的话,一般不用大瓶子,先用小瓶子养起来再换大的,不然会长得很慢,严重的,会导致细胞死亡等危险),McA-RH7777大鼠肝癌细胞株平衡完成后,离心(1000rpm,3min)收集细胞,弃上清,用新的培养基重悬细胞并接种至培养瓶或皿中,放回培养箱继续培养。生物安全级别: 1

产品种属: 大鼠

组织来源: 肝; 疾病:肝癌

细胞形态: 上皮样

"T25瓶及离心管在培养箱平衡是为了让细胞尽快适应培养箱环境,同时使部分因运输导致脱落的细胞贴壁,此步骤非常必要。T25瓶如果在显微镜下可以看到部分不贴壁的细胞,可以收集上清后离心(1200rpm,5min)后,将沉淀用新的培养基重悬后接种至新的培养瓶或皿中。

部分细胞在运输过程中,由于不断震荡及环境不适,可能导致细胞破碎死亡,从而使培养基中漂浮很多细胞碎片及颗粒状物质。这种情况下,平衡后,贴壁细胞用PBS洗两遍再加新的培养基培养或者传代至新瓶中培养即可;悬浮细胞可以离心(1000rpm,3min)收集细胞,并用PBS重悬后再离心一次,再用新的培养基重悬并接种细胞。细胞特性:" 贴壁

"细胞培养基的选择和使用:

MEM:成分简单,贴壁细胞。

DMEM:分高糖型和低糖型。

IDMEM:适合细胞密度低,生长困难的细胞。如杂交细胞的筛选,DNA转染后转化细胞的筛选培养。

RPM1640:应用广泛的培养基之一。悬浮细胞培养,主要针对淋巴细胞,也适合其他细胞。

199、109培养基:成分齐全,培养效果较好。

F10培养基:适合小鼠及人类二倍体细胞培养。

F12培养基:适合单细胞分离培养及无血清培养。

McCoy’s5A培养基:特别适合原代细胞及较难培养细胞的生长。" 95%(Viability by Trypan Blue Exclusion),冻存液中含有DMSO请使用细胞级DMSO,同时浓度不要太高,部分细胞在10%DMSO条件下冻存会死亡,所以DMSO浓度5%-8%是比较推荐的浓度。细胞冻存及复苏遵循慢冻快融的原则,即取0.2-0.3ml的冻存液重悬的细胞于一个冻存管中,与正常体积冻存的细胞共同冻存,至液氮后复苏检查冻存结果。冻检合格前,留一部分细胞继续培养,以防万一。

细胞检测: 细胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌

培养条件: 选择此细胞合适的培养基(DMEM低糖、DMEM高糖、RPMI-1640、McCoy39;s 5A等培养基)89%和10%PBS及1%双抗(防止污染)或者此细胞的完全培养基或者此细胞的专用培养基;生长条件:空气,95%;二氧化碳,5%; 温度:37 ℃(模拟人体正常温度培养,这也是体外培养合适的温度)

传代比例建议1:2-1:3,长得比较快的细胞可以1:3,比较慢的按1:2传代。传代后,建议不要使用传代前培养所使用的培养基,会有大量细胞碎片甚至导致细胞死亡的风险。细胞状态不好McA-RH7777大鼠肝癌细胞株或者生长极慢的时候,可以通过增加血清浓度调整细胞状态及生长速度。请不要随意更换培养基,因实验需要,可以逐步驯化(让它们慢慢适应)。传代方法: 建议1:2-1:3 两天换液一次

冻存条件: 详见细胞说明书

冻存液配方:建议使用92%PBS+8%DMSO,客户自身实验室所使用的冻存液也可以适用,血清浓度不低于30%,DSMO含量不高于12%即可。细胞请于细胞培养箱中培养,大部分细胞是37℃,5%CO2,湿度100%环境下培养的。有极少部分细胞培养条件不一致,请仔细阅读相应的细胞说明书,使用正确的培养基及培养条件;细胞于培养瓶或皿中培养,加入适量说明书上标注的细胞相应完全培养基(一般液面高度2-3mm即可)。主要文献: "请具体查阅相关发表文章,接收细胞相关问题:如不能在收到细胞后及时操作细胞,T25及离心管发货的细胞将可以消毒后在37度过夜,血清发货的细胞在室温下静置1-2天(注意不要放冰箱),干冰发货的可以在确认干冰未完全升华时将细胞直接放回液氮或者-80度冰箱,若干冰完全升华,请即刻复苏细胞。

T25瓶及离心管在培养箱平衡是为了让细胞尽快适应培养箱环境,同时使部分因运输导致脱落的细胞贴壁,此步骤非常必要。T25瓶如果在显微镜下可以看到部分不贴壁的细胞,可以收集上清后离心(1200rpm,5min)后,将沉淀用新的培养基重悬后接种至新的培养瓶或皿中。

部分细胞在运输过程中,由于不断震荡及环境不适,可能导致细胞破碎死亡,从而使培养基中漂浮很多细胞碎片及颗粒状物质。这种情况下,平衡后,贴壁细胞用PBS洗两遍再加新的培养基培养或者传代至新瓶中培养即可;悬浮细胞可以离心(1000rpm,3min)收集细胞,并用PBS重悬后再离心一次,再用新的培养基重悬并接种细胞。"