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解冻细胞常见实验问题分析及推荐解决方法:

在解冻冻存细胞时,发现会出现存活率低、大量细胞碎片及生长缓慢等问题,究竟是什么原因导致,我们该怎么进行解决以下是国内外细胞培养专家针对解冻细胞实验问题,总结的一些解决方案!

出现低存活率的可能原因及推荐解决方案如下:

1.解冻过程中细胞裂解                      

推荐的解决方案:可预期到一定量的细胞死亡,因此细胞的浓度应足够高,考虑到这一损失。起始浓度为110(6)至110(7)细胞/毫升。

2.解冻过程中的问题

推荐的解决方案:在-70℃至-80℃下保存冷冻的培养物,保存时间为1-5天,但这不是保存的方法。在37℃充分解冻后应立即开始培养。

3.对冷冻液过敏

推荐的解决方案:A.完全或部分更换培养基,减少培养基中冷冻液的量。在24小时后更换培养液体可全部去除冷冻液。B.留出更多时间供培养物恢复。有时细胞需要几周时间才能形成单层或密集的悬浮物,取决于冷冻时细胞的年龄或传代次数或在生长阶段中的位置。冷冻的条件在对数期。

4.被冷冻的原种细胞的年龄或冷冻时培养物的年龄

推荐的解决方案:解冻近冷冻的细胞。细胞处于冷冻状态的时间越长,存活率越低。检查冷冻细胞的时间和方法。在冷冻时细胞应处于对数期。

出现大量细胞碎片的可能原因及推荐解决方案如下:

1.冷冻时细胞密度过低:推荐的解决方案:缩短解冻过程中的时间。将细胞取出后,立即将冻存管浸入在37℃的水浴中,并震荡至全部融化,然后迅速地转移到预热的培养基中。

2.不适当的冷冻过程:推荐的解决方案:解冻不同冷冻室总的试管。确保在冻存过程中采用的适当的技术,并确保使用了适量和适合的冷冻液。

出现生长缓慢的可能原因及推荐解决方案如下:

1.培养瓶的大小:一般解决方案是一些细胞在培养基中倾向于维持一定的密度。将培养物转移到较小的培养瓶中,使细胞密度上升;如,根据培养基的体积,从T75培养瓶转移到2或3个T25培养瓶中。

2.细胞密度过低:通常解决方案是提高未来冷冻物种细胞的冻存密度,或使用较小的培养容器,或解冻多个试管来进行培养。" SW 839细胞株哪家有 "

CRL-2076 CCD-1064Sk贴壁培养细胞株

CRM-CCL-2 HeLa贴壁培养细胞株

CRL-5938 NCI-H2286 [H2286]贴壁培养细胞株

CCL-167 MPC-11贴壁培养细胞株

CRL-1651 COS-7贴壁培养细胞株

CCL-205 CCD 18Lu贴壁培养细胞株

HTB-11 SK-N-SH贴壁培养细胞株

CRL-5982 NCI-H1963 [H1963]贴壁培养细胞株

HTB-81 DU 145贴壁培养细胞株

CRL-2733 F19贴壁培养细胞株

CRL-8027 OKT 11贴壁培养细胞株

CRL-1491 CCD-34Lu贴壁培养细胞株

CRL-2617 CCD-1131Sk贴壁培养细胞株

CRL-2014 HGF-1贴壁培养细胞株

CRL-2096 CCD-1076Sk贴壁培养细胞株

CRL-1601 McA-RH7777贴壁培养细胞株

CRL-1619 A-375 [A375]贴壁培养细胞株

HTB-72 SK-MEL-28贴壁培养细胞株

CRL-5984 NCI-H2108 [H2108]贴壁培养细胞株

HTB-107 SW579 [SW 579, SW-579]贴壁培养细胞株

CCL-215 CCD-25Lu贴壁培养细胞株

CRL-1541 CCD-112CoN贴壁培养细胞株

CCL-237 SW948 [SW-948]贴壁培养细胞株

CRL-5817 NCI-H889 [H889]贴壁培养细胞株

CRL-1446 H9c2(2-1)贴壁培养细胞株

HTB-91 SW 684 [SW-684, SW684]贴壁培养细胞株

CRL-1503 STO贴壁培养细胞株

CRL-10302 SW756贴壁培养细胞株

CRL-9520 SV-HUC-1贴壁培养细胞株

HTB-55 Calu-3贴壁培养细胞株

CCL-256 NCI-H2126 [H2126]贴壁培养细胞株

CRL-5912 NCI-H2023 [H2023]贴壁培养细胞株"