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GIRARDI HEART C2复苏细胞株

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邓博
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GIRARDI HEART C2复苏细胞株
关键词: 细胞

GIRARDI HEART C2复苏细胞株 "

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培养细胞的冻存及复苏:

细胞低温冻存是培养室常规工作和通用技术。细胞冻存在-196℃液氮中,储存时间几乎是无限的。细胞冻存及复苏的原则是慢冻快融。

1. 冻存细胞

(1)选对数增生期细胞(证明无支原体污染),在冻存前1d换液。

(2)按常规方法把培养细胞制备成悬液,计数,使细胞密度达510/ml左右密度,离心,去上清。

(3)加入配制好的冻存液(培养液6.8ml,小牛血清2ml,DMSO 1ml,5.6%NaHCO3 0.1ml),按与去上清相同的量一滴一滴加入离心管中,然后用吸管轻轻吹打令细胞重悬。冻存细胞时培养液中加入保护剂10%二甲基亚砜(DMSO)或甘油,可使冰点降低,使细胞内水分在冻结前透出细胞外。

(4)分装于无菌冻存管中,每管加1.5m悬液。

(5)旋好冻存管并仔细检查,一定要盖紧,做好标记。

(6)冻存:在特殊的仪器或简易的液氮容器中,按-1℃/min的速度,在30~40min时间内,下降到液氮表面,再停30min后,直接投入液氮中。要适当掌握下降冷冻速度,过快能影响细胞内水分透出,太慢则促进冰晶形成。

操作时应戴防护眼镜和手套,以免液氮冻伤。

2.复苏细胞

(1)从罐中取出冻存管。

(2)迅速放入36℃~37℃水浴,不时摇动,使其急速融化,30~60s内完成。

(3)冻存管用70%酒精擦拭消毒后,打开盖子,用吸管将细胞悬液注入离心管中,再滴加10ml培养液。

(4)低速离心(500~1000r/min) 5min,去上清后再用培养液洗一次。

(5)用培养液适当稀释后,装入培养瓶37℃培养,次日更换一次培养液后,继续培养。以后仍按常规进行培养。

冻存细胞数量要充分,密度应达到10/ml,在融后稀释20倍时,仍能保持510/ml数量。" GIRARDI HEART C2复苏细胞株 "

CRL-5875 NCI-H1563贴壁培养细胞株

CRL-5876 NCI-H1568贴壁培养细胞株

CRL-5877 NCI-H1573贴壁培养细胞株

CRL-5878 NCI-H1581贴壁培养细胞株

CRL-5879 NCI-H1618贴壁培养细胞株

CRL-5881 NCI-H1623贴壁培养细胞株

CRL-5882 NCI-H1648贴壁培养细胞株

CRL-5883 NCI-H1650贴壁培养细胞株

CRL-5884 NCI-H1651贴壁培养细胞株

CRL-5885 NCI-H1666贴壁培养细胞株

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CRL-5887 NCI-H1693贴壁培养细胞株

CRL-5888 NCI-H1694贴壁培养细胞株

CRL-5889 NCI-H1703贴壁培养细胞株

CRL-5891 NCI-H1734贴壁培养细胞株

CRL-5892 NCI-H1755贴壁培养细胞株

CRL-5893 NCI-H1770贴壁培养细胞株

CRL-5894 NCI-H1781贴壁培养细胞株

CRL-5895 NCI-H1792贴壁培养细胞株

CRL-5896 NCI-H1793贴壁培养细胞株

CRL-5897 NCI-H1819贴壁培养细胞株

CRL-5898 NCI-H1836贴壁培养细胞株

CRL-5899 NCI-H1838贴壁培养细胞株

CRL-5900 NCI-H1869贴壁培养细胞株

CRL-5901 NCI-H1870贴壁培养细胞株

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CRL-5903 NCI-H1882贴壁培养细胞株

CRL-5904 NCI-H1915贴壁培养细胞株

CRL-5905 NCI-H1926贴壁培养细胞株

CRL-5906 NCI-H1930贴壁培养细胞株

CRL-5907 NCI-H1944贴壁培养细胞株

CRL-5908 NCI-H1975贴壁培养细胞株"

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